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EB染色液

EB染色液

產品編號:EB001-04

產品規格:10ml

數量
價格 ¥150

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EB染色液

產品編號

產品名稱

包裝

EB001-04

EB染色液

10 ml

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說明書

一份

● 產品簡介:

EB染色液是EB的水溶液,濃度為10mg/mlEB(溴化乙錠)能與核酸分子特異結合,用于觀察瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中DNARNA分子。廣泛應用于核酸電泳前后的染色以及流式細胞儀的樣品染色處理等。溴化乙錠(Ethidium BromideC21H20N3Br;分子量為394.32)含有一個可以嵌入DNA 堿基的三環平面基團。它與DNA 的結合沒有堿基序列特異性。大約每2.5 個堿基插入一個溴化乙錠分子。當染料分子插入后,紫外激發后呈現熒光,可以檢測到10ng DNA 條帶。

● 保存、運輸及效期:

常溫避光保存;常溫運輸;有效期兩年。

● 注意事項:

    EB有一定毒性,使用時請使用一次性手套操作,注意防護!

●  使用說明:

使用前,先離心快甩EB溶液至管底,以防開蓋后EB造成的污染。

1. 瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色(預染法):

1. 按照所需濃度稱取瓊脂糖,加入TAE或TBE緩沖液,在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下時,按照稀釋10000倍加入10 mg/ml EB溶液,如100ml凝膠加入EB量為10 μl;徹底搖勻后鋪膠并插入梳子。

3. 凝固后,將梳子輕輕拔出。

4. 上樣電泳,電泳結束后紫外觀察。

注:預染法,EB染色會出現陰陽膠現象,即隨著電泳時間延長,較小的片段會染色不清楚。參見實驗示例。可以將凝膠用后染法染色即可看到小片段條帶。

2. 瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色(后染法):

1. 按照所需濃度稱取瓊脂糖,加入TAE或TBE緩沖液,在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下時,不要加入EB溶液,直接鋪膠并插入梳子。

3. 凝固后,將梳子輕輕拔出。

4. 上樣電泳。

5. 電泳結束后將凝膠浸泡在含有EB的TAE或TBE染色液中(染色液配制:100ml 緩沖液中加入100-200 μl EB溶液,混勻)染色15-20分鐘;TAE或TBE緩沖液中脫色10-15分鐘。

6. 紫外觀察結果。

 

●  實驗示例:




 
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